DNA的粗提取与鉴定生物选修一知识点考点
高中生物学知识往往环环相扣，上一个知识的学习就是为下一个知识的学习奠定理论和知识基础，下面是小偏整理的DNA的粗提取与鉴定生物选修一知识点考点，感谢您的每一次阅读。
DNA的粗提取与鉴定生物选修一知识点考点
提取DNA的溶解性原理包括DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度的特点：在0.14mol/L时溶解度最小;要使DNA溶解，需要较高浓度?要使DNA析出，又需要0.14mol/L的浓度?
在溶解细胞中的DNA时，人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精)，但细胞中蛋白质可溶于酒精。
从理论上分析，预冷的乙醇溶液具有以下优点。一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解;二是降低分子运动，易于形成沉淀析出;三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。
采用DNA不溶于酒精的原理，可以达到的目的是：将DNA和蛋白质进一步分离。
提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。
补充：DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋，其温度在80℃以上，如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。
当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用什么指示剂进行鉴定?
答：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。
原理总结：通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来，达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。
实验材料的选取：
不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。
鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液。
破碎细胞，获取含DNA的滤液：
若选用鸡血和洋葱作实验材料，则怎样获取含DNA的滤液?
答：在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒搅拌，过滤后收集滤液;切碎洋葱，加入一定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过滤后收集滤液。
为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA。
在以上实验中，加入蒸馏水、洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
答：过滤时应当选用(滤纸、尼龙布)。血细胞在蒸馏水中大量吸水而张裂;洗涤剂瓦解细胞膜;食盐溶解DNA物质;选用尼龙布进行过滤。
在处理植物组织时需要进行研磨，其目的是什么?研磨不充分产生什么结果?
答：破碎细胞壁，使核物质容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分会使DNA的提取量减少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。具体做法。10mL鸡血+20mL蒸馏水→同方向搅拌→3层尼龙布过滤→滤液。
为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质?
答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质，需要进一步提纯DNA。
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;
方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA;
方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。
方案二与方案三的原理有什么不同?
答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。
析出与鉴定：
在滤液中仍然含有一些杂质，怎样除去这些杂质呢?得到的DNA呈何颜色?
答：滤液与等体积的冷却酒精混合均匀，静置2～3分钟，析出的白色丝状物就是DNA。DNA呈白色。
怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA呢?
答：具体做法：试管2支，编号甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色丝状物，使之溶解→各加4mL二苯胺，混合均匀→沸水浴5min→观察颜色变化。
实验操作：
制备鸡血细胞液：加柠檬酸钠，静置或离心
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破碎细胞，释放DNA：加蒸馏水，同一方向快速通方向搅拌→过滤，除去细胞壁、细胞膜等。
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溶解核内DNA：加入NaCl至2mol/L，同一方向缓慢搅拌
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DNA析出：加蒸馏水至0.14mol/L，过滤，在溶解到2mol/L溶液中→除去细胞质中的大部分物质。
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DNA初步纯化：与等体积95%冷却酒精混合，析出白色丝状物→除去核蛋白、RNA、多糖等。
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DNA鉴定：二苯胺，沸水浴，呈现蓝色
注意事项：在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固;鸡血静置或离心以提高细胞悬液浓度;使用塑料烧杯;使用尼龙布过滤;玻棒沿同一方向搅拌;玻棒搅拌要缓慢(细胞破裂快速搅拌);玻棒不要碰到烧杯壁;二苯胺试剂要现用现配等。
思维导图在高中生物教学中的具体应用
1.思维导图在新授课中的应用
思维导图的应用，不仅能优化教学内容，还能提高教学效率，让学生的学习有的放矢，减少学习的盲目性。因此，在新授课的课堂导入环节中，教师可借助思维导图构建知识之间的联系，让学生明确生物学习的内容以及学习的目的，从而引起学生对生物学习的重视。例如，在《细胞的物质输入和输出》的新授课中，为了让学生对本章内容有所了解，教师预先借助绘图软件绘制了思维导图，将完整的知识脉络呈现给学生。以“细胞的物质输入和输出”为一级主题，进行知识点之间的发散构建，二级主题包括物质跨膜运输的实例、生物膜的流动镶嵌模型、物质跨膜运输的方式，也就是生物课程中每节的主题内容。接下来，继续以二级主题为核心进行三级主题的拓展———物质跨膜运输的实例包括细胞的吸水和失水、物质跨膜运动的其他实例、选择透过性膜;生物膜的流动镶嵌模型包括对生物膜结构的探索历程、流动镶嵌模型基本内容;物质跨膜运输的方式包括小分子物质或离子跨膜运输方式、大分子物质或颗粒状物质进出细胞的方式。这些是在教学内容的基础上进行的逻辑构建。此外，教师还要把学习本章的意义和功能、学习的方法等同作为一级标题与之并列，让学生在学习前对本章的内容、学习方法和重要性有充分的认识，为学生接下来的学习奠定基础。
2.思维导图在复习课中的应用
高中生物学知识往往环环相扣，上一个知识的学习就是为下一个知识的学习奠定理论和知识基础，强调学生学习思维的逻辑性，这就需要教师在教学中构建知识网络构图。对此，教师可通过手工方式来绘制思维导图，并在教学中进行应用，尤其是在复习课中进行应用，这样不仅能提高复习效率，还能减轻学生的学习负担。例如，教师在组织学生复习高中生物内容时，可以第一、二章《走近细胞》《组成细胞的分子》为单位，第三、四章(《细胞的基本结构》《细胞的物质输入和输出》)为单位等进行思维导图的绘制。教师在绘制思维导图的整个过程中要与学生一起共同完成，让学生跟着教师的思维完成知识网络的构建，将学生头脑中零散的知识点整合起来。细胞是生命的基本单位，这是第一章的主要内容，教师在绘制思维导图时要以此为起点引导学生对细胞种类、细胞生命的意义等知识点进行回顾，并由此引出细胞的组成结构;而对组成细胞的成分：元素和化合物、蛋白质、核酸、糖类和脂类、无机物等知识点的介绍，应由学生来完成。绘制思维导图的过程即学生复习知识的过程，也是查缺补漏的过程。
3.思维导图在学生笔记中的应用
俗话说：“好记性不如烂笔头。”记笔记是高中生普遍应用的一种学习方式，但记笔记往往会演变成抄老师的板书，很多时候学生急于跟上老师的节奏而快速记录，根本不知道自己写的是什么，失去了记笔记的意义，学生的学习依然处于被动状态。思维导图就是要学生将自己的想法通过导图的方式呈现，改变传统的学习方法和思维，体会学习的乐趣。例如，在整理《细胞的能量供应和利用》的笔记中，学生可结合教师课堂讲授的内容以及零散笔记的内容，通过自己深入的思考，按照主题、分支、内容完善的步骤绘制出专属自己的知识网络图。这样，学生切身体会到学习生物的成就感，激发了继续学习生物的兴趣。